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帶你了解尺寸排阻色譜柱的相關(guān)知識點

更新時間:2022-08-28  |  點擊率:1361
尺寸排阻色譜柱由親水性球形聚甲基丙烯酸酯顆粒填充,主要針對小分子蛋白、蛋白片段、多肽、寡核苷酸的分離分析。
 
特點:
 
1.保留時間是分子尺寸的函數(shù),有可能提供分子結(jié)構(gòu)的某些信息。2.保留時間短,譜峰窄,易檢測,可采用靈敏度較低的檢測器。
3.固定相與分子間作用力極弱,趨于零。由于,柱子不能很強保留分子因此柱壽命長。
4.不能分辨分子大小相近的化合物,相對分子質(zhì)量差別必須大于10%能得以分離。
5.大分子的流程短,移動速度快,先流出色譜柱;小分子的流程長,移動速度慢,后流出色柱;而中等分子居兩者之間。
6.生物相容性好,有很高的活性回收率。
 
流動相的選擇:
 
排阻色譜所選用的流動相必須能溶解樣品,并必須與凝膠本身非常相似,這樣才能潤濕凝膠。當采用軟性凝膠時,溶劑也必須能溶脹凝膠。溶劑的粘度要小,因為高粘度溶劑往往限制分子擴散作用而影響分離效果。
 
尺寸排阻色譜柱的保存:
 
日常使用中,建議保存在150mM磷酸鹽緩沖液中(pH7.0)。如長期不用時,可將色譜柱保存至20%乙醇中,以防止菌體污染。(注:可根據(jù)具體使用條件選擇保存方式,如實驗條件為緩
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